Análisis molecular del endosimbionte wolbachia spp en la microfolariasis canina por acanthocheilonema reconditum
No Thumbnail Available
Date
2021
Authors
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Universidad Santiago de Cali
Abstract
Microfilariae are a group of nematodes whose main host is the dog and, to a lesser extent, the human. These filariae are transmitted through mosquitoes of the following genera: Culex, Anopheles and Aedes, as well as fleas, lice, among other vectors, depending on the species of the nematode. Regarding A. reconditum, it is an occasional zoonotic pathogen that affects subcutaneous tissue and perirenal fat; causing common but clinically less important infections in dogs. On the other hand, there are other filariae such as D. immitis; which causes the pathology known as heartworm. A disease that on many occasions can be fatal for the canine that harbors it. The main characteristic of these nematodes is their endosymbiotic relationship with the intracellular bacterium Wolbachia spp, which is essential for the development and fertility of the nematodes. On A. reconditum there is little scientific literature in the world, given its limited distribution. This parasite is of great interest at the local level, since in a recent study carried out at the Santiago de Cali University, by the GIMIA research group, it has been found as a causal agent of microfilariasis in an outbreak detected in Cali since 2016, which The clinical manifestations mainly include anemia. The objective of the present study was to molecularly characterize the endosymbiont Wolbachia spp, and evaluate the formation of Wolbachia spp with A. reconditum in a cohort of dogs with microfilariae and their possible vectors at the local level. For this, the amplification of the Wolbachia gene (rrs) by conventional PCR and the ftsZ gene by nested PCR was implemented. As a result, it was obtained that none of the samples obtained from canines infected with A. reconditum were positive for Wolbachia (0/82), while these two molecular tests were positive in the different arthropods evaluated (100%). In conclusion, it was possible to standardize and establish the methods of the diagnostic techniques for the endosymbiont bacterium Wolbachia spp. On the other hand, standardized molecular techniques, the ftsZ-based method, was the most effective for the identification of Wolbachia in DNA samples positive for canine microfilariasis compared to the rrs-based method.
Description
Las microfilarias, son un grupo de nemátodos que tienen como principal hospedador al perro y en menor proporción al humano. Estas filarias son transmitidas a través de mosquitos de géneros: Culex, Anopheles y Aedes, así como pulgas, piojos, entre otros vectores, dependiendo de la especie del nematodo. Con respecto A. reconditum es un patógeno zoonótico ocasional que afecta el tejido subcutáneo y la grasa perirrenal; ocasionando infecciones comunes, pero clínicamente menos importantes en perros. Por otro lado, existen otras filarias como D. immitis; la cual ocasiona la patología conocida como gusano corazón. Una enfermedad que en muchas ocasiones puede ser mortal para el canino que la alberga. La característica principal de estos nematodos es su relación endosimbiótica con la bacteria intracelular Wolbachia spp, la cual es esencial para el desarrollo y fertilidad de los nemátodos. Sobre A. reconditum existe poca literatura científica en el mundo, dada su escasa distribución. Este parasito es de gran interés a nivel local, ya que en un estudio reciente realizado en la universidad Santiago de Cali, por el grupo de investigación GIMIA se ha encontrado como agente causal de microfilariasis en un brote detectado en Cali desde el año 2016, cuyas manifestaciones clínicas incluyen principalmente anemia. En este contexto el presente estudio tuvo como objetivo, caracterizar molecularmente al endosimbionte Wolbachia spp, y evaluar la confección Wolbachia spp con A. reconditum en una cohorte de perros con microfilarias y en sus posibles vectores a nivel local. Para ello, se implementó la amplificación del gen (rrs) de Wolbachia mediante PCR convencional y del gen ftsZ por PCR anidada. Como resultado se obtuvo que ninguna de las muestras obtenidas de caninos infectados con A. reconditum fueron positivas para Wolbachia (0/82), mientras que estas dos pruebas moleculares fueron positivas en los diferentes artrópodos evaluados (100%). En conclusión, se logró estandarizar y establecer los métodos de las técnicas diagnósticas para la bacteria endosimbionte Wolbachia spp. Por otro lado, las técnicas moleculares estandarizadas, el método basado en ftsZ, fue el más efectivo para la identificación de Wolbachia en muestras de ADN positivas para microfilariasis canina en comparación con el método basado en rrs.
Keywords
Wolbachia Spp, Caninos, Ftsz, Rrs, PCR
Citation
Rincón Hurtado, R. G. (2021). Análisis molecular del endosimbionte wolbachia spp en la microfolariasis canina por acanthocheilonema reconditum. Universidad Santiago de Cali.